原位杂交技术(荧光原位杂交技术)

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原位杂交的原理是什么?有何用途

以正确反映组织与细胞之间相互关系及功能、代谢状态、探索疾病发病机理、观察治疗疗效和评估疾病预后等。其次为对外源性基因检测,以获得病毒和细菌类型等病原学诊断。而DNA原位杂交主要为外源性基因检测。

实验方法原理:FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。

FISH的基本原理是用荧光标记的单链核酸为探针,与待检材料中未知的单链核酸进行特异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。可用荧光标记的探针直接与染色体进行杂交从而对基因进行染色体定位。

原理 FISH(fluorescence in situ hybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。

原位杂交:原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。

原位核酸分子杂交技术简称原位杂交含义是什么?

RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。

原位杂交组织化学技术,简称原位杂交,是一种在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术,敏感度高,特异性强,是当前分子生物学研究的重要手段。

原位杂交:用核苷酸探针对特殊的核苷酸顺序在其原位进行杂交,叫原位杂交。可用于DNA、RNA定位研究。

原位杂交技术(荧光原位杂交技术)

荧光原位杂交(FISH)实验操作步骤

1、)张切片加10μl~20μl DAPI,覆盖盖玻片并在室温下孵育2~5ml;2)尽可能快的在荧光显微镜下观察或封闭盒内保存在-20℃冰箱。切片在染色之后1h内可以在显微镜下观察。

2、荧光显微镜观察FISH结果 先在可见光源下找到具有细胞分裂相的视野,然后打开荧光激发光源,FITC的激发波长为490 nm。细胞被PI染成红色,而经FITC标记的探针所在的位置发出绿色荧光。

3、操作步骤如下:(1)载片的清洁与处理载片的清洁很重要,特别不能有核酸酶的污染。为了在后续的杂交和冲洗等步骤中防止组织或细胞从载片上脱落,可以用多聚赖氨酸涂抹载片。

4、(1)20×SSC:173 g NaCl,82 g柠檬酸钠,加水至1 000 mL(用10 mol/L NaOH调pH 至0)。(2)去离子甲酰胺(DF):将10 g混合床离子交换树脂加入100 mL甲酰胺中。

原位杂交的原理是什么?有何用途?

原位杂交是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。

实验方法原理:FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。

FISH的基本原理是用荧光标记的单链核酸为探针,与待检材料中未知的单链核酸进行特异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。可用荧光标记的探针直接与染色体进行杂交从而对基因进行染色体定位。

原位杂交:原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。

原位杂交结果,eber阳性意思的意思是:有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制,会传染。原位杂交是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。

荧光原位杂交的原理:FISH(fluorescence in situ hybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。

简述原位杂交的步骤。

1、试验方法如下:1)玻片处理(a)玻片清洗:热肥皂水刷洗,1%盐酸浸泡24h,再在0.1%焦炭酸二乙酯(DEPC)中浸泡24h。(b)硅化处理:玻片和盖玻片1%(质量分数)盐酸煮沸10min,烘干,锡纸包好4℃保存备用。

2、菌落原位杂交法氢氧化钠的作用是裂解细菌,菌落的原位杂交法的具体步骤:将分散再若干个平板上的少数菌落均匀点接到一个主平板上,并接上一个含有非重组质粒的转化子作对照,在37摄氏度下培养过夜,使菌落密度适中。

3、浸入乙酸酐和三乙醇胺中以减低静电效应,减少探针对组织的非特异性背景染色。将组织切片浸入预杂交液中可达到封闭非特异性杂交点的目的,从而减低背景染色。预杂交液和杂交液的区别在于前者不含探针和dextran sulphate。

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